可见分光光度计及使用方法及步骤

一、原理

分光光度计的基本原理是：物质在光的照射下会产生对光吸收的效应，而且物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同物质都具有其各自的吸收光谱。因此不同波长的单色光通过溶液时其光的能量就会被不同程度的吸收，光能量被吸收的程度和物质的浓度有一定的比例关系，即符合比耳定律。

其中：T—透射比 A—吸光度 I0—入射光强度 a—吸收系数

I—透射光强度 b—溶液的光程长度 c—溶液的浓度

由上式可以看出当吸收系数a与光程长度b不变时，吸光度与溶液浓度成正比。本仪器正是依据这一原理而设计的

二、用途

本仪器可供物理、化学、医学、生物学等学科进行科研或供化学工业、食品工业、制药工业、冶金工业、临床生化、环境保护部门进行各种物质的定性定量分析。

可见分光光度计的使用方法如下：

可见分光光度计仪器工作电源一般为220V，允许10%的电压波动，为了延长光源使用寿命，在不使时不要开光源灯，单色器是仪器的部分，装在密封盒内不能拆开，为防止色散元件受潮发霉，必须经常更换蛋色器盒干燥剂。

（1）分光光度仪器工作电源一般为220V，允许10%的电压波动。

（2）为了延长光源使用寿命，在不使时不要开光源灯。

（3）单色器是仪器的部分，装在密封盒内不能拆开，为防止色散元件受潮发霉，必须经常更换单色器盒干燥剂。

（4）必须正确使用吸收池，保护吸收池光学面。

（5）光电转换元件不能长时间暴光，应避免强光照射或受潮积尘。

可见分光光度计具体操作流程如下：

一、可见分光光度计开机

1、开机前，检查电源插座是否接上；

2、启动电源开关，仪器显示“723C”

3、仪器经自测后，按“MODE”键后再按“2”键，仪器显示“DATA”

二、可见分光光度计基本使用方法

1、按“GO TO λ”键，输入设定波长；

2、四个比色皿，其中R位置放置参比试样，其余三个放入待测试样。将比色皿放入样品池内的比色皿架中，盖上样品池盖；

3、将参比试样推入光路，按“ABS%”键，使仪器自动调零和置满度；

4、然后将待测试样推入光路，显示试样的吸光度值；

5、如果要想将待测试样的数据打印出，只需按“START/STOP”键即可。

可见分光光度计使用注意事项：

1、每天使用结束后，应仔细检查样品室内是否有溶液溢出，若有溢出必须随时用滤纸吸干；

2、可见分光光度计仪器使用完毕，用防尘套罩住。

紫外可见分光光度计用法简要过程

开机：打开电脑以及分光光度计。

软件的打开：直接点击图标，然后从菜单栏，文件——打开，找到相关标线打开。（另一种方法，从我的电脑——紫外——找到标线打开）

点击connecTIon，机器自检，待自检结束，点击“OK”（若实验前机器处于打开状态就不会出现自检）

调零：首先在里面一个通道放装有蒸馏水的比色皿（放入比色皿后一定要把盖关闭），调零。然后再外面一个通道放装有蒸馏水的比色皿，观察吸光度，选择的一个，然后再次调零。（多点几次调零键，以确保调零）

测样：用选择好的比色皿测试，首先用要测得样品润洗比色皿两到三次。然后倒入样品（注意，拿比色皿时，不要碰到光滑面，用手指捏住毛面即可，倒液体尽量不要溢出到光面，如有溢出，用擦镜纸擦干，观察，没有水珠和痕迹，再放入通道中。以免影响吸光度。）

在数据栏，ID栏敲入数字编码，然后把光标放在浓度或者吸光度栏，点击read，得吸光度。（测样品时应多取几次样品做平行，直到结果数字相近）测量结束后，保存数据并把数据抄录下来，做进一步的计算分析。

断开连接，点击unconnenTIon。关闭分光光度计，电脑。关掉电源。用蒸馏水清洗用过的比色皿，放回原处。把实验台上整理干净。

吸附实验流程：取适当初始浓度的样品，加入适量管——震荡或者搅拌一定时间——离心分离——取样，稀释至50ml——分光光度计检测——记录数据

注意：

1，离心分离时要选择一样的管，并且倒入相同的样品。

2，实验过程要做好详细记录。

3，实验结束把用过的仪器，器皿，清洗干净，烘干。

三、粉末样品的制备

1．选择高质量的微栅网（直径3mm），这是关系到能否拍摄出高质量高分辨电镜照片的步；（注：高质量的微栅网目前本实验室还不能制备，是外购的，价格20元/只；普通碳膜铜网提供使用。）

2．用镊子小心取出微栅网，将膜面朝上（在灯光下观察显示有光泽的面，即膜面），轻轻平放在白色滤纸上；

3．取适量的粉末和乙醇分别加入小烧杯，进行超声振荡10~30min，过3~5 min后，用玻璃毛细管吸取粉末和乙醇的均匀混合液，然后滴2~3滴该混合液体到微栅网上（如粉末是黑色，则当微栅网周围的白色滤纸表面变得微黑，此时便适中。滴得太多，则粉末分散不开，不利于观察，同时粉末掉入电镜的几率大增，严重影响电镜的使用寿命；滴得太少，则对电镜观察不利，难以找到实验所要求粉末颗粒。建议由老师制备或在老师指导下制备。）

4．等15 min以上，以便乙醇尽量挥发完毕；否则将样品装上样品台插入电镜，将影响电镜的真空。